مطالعه اثر آسپیرین بر هیستون ۵ h و کمپلکس dna- h۵

هیستون های رابط (h1 و h5) نقش مهمی در سازماندهی کروماتین دارند و به عنوان بازدارنده های بیان ژن شناخته می شوند. هسته گلبول های سرخ بالغ جوجه (و بعضی سلول های جانوری) حاوی هر دو پروتیین است. هر چند که میان کنش هیستون h5 با dna قوی تری از میان کنش h1 است، ولی مانع بیان برخی ژن های ویژه اریتروییدی نمی شود. بررسی ها نشان داده که بعضی دگرگونی ها نقش بسیار مهمی در میان کنش هیستون ها با dna، به خصوص در تنظیم رونویسی دارد. استیله شدن هیستون ها باعث تغییر شکل کروماتین به فرم فعال می شود. آسپیرین به عنوان یک استیله کننده غیر آنزیمی پروتیین ها پیشنهاد و در طی سال های اخیر نیز، از آن به عنوان یک داروی ضد سرطان استفاده شده است. در این مطالعه، ابتدا هیستون h5 با یک روش اصلاح شده از گلبول های سرخ جوجه استخراج، خلوص و شناسایی آن به وسیله الکتروفورز sds-page و با استفاده از پروتیین استاندارد، انجام گرفت. مطالعات اسپکتروفتومتری حاصل از انکوبه کردن هیستون h5 با آسپیرین در لرزاننده نشان داد که شرایط بهینه برای استیله شدن h5 توسط آسپیرین، غلظت 5/6 میلی مولار آن در مدت 5/3 ساعت در دمای اتاق می باشد. مطالعات فلوریمتری نشان داد که انکوبه شدن هیستون h5 با آسپیرین در شرایط بهینه باعث کاهش نشر آن می شود که این امر ناشی از استیله شدن پروتیین و باز شدن نسبی تاخوردگی آن است. همچنین پروتیین استیله شده نسبت به پروتیین طبیعی تحرک الکتروفورتیک کمتری را در الکتروفورز در حضور غیرطبیعی کننده (sds-page)، نشان داد که این امر به دلیل افزایش وزن مولکولی آن است. مطالعات بعدی، بررسی میان کنش هیستون h5 استیله در مقایسه با شکل طبیعی آن، با dna بود. میان کنش هیستون استیله شده توسط آسپیرین با dna کاهشی حدود 15 واحد در نسبت مولی جفت باز dna به هیستون را در 50% رسوب، در مقایسه با هیستون طبیعی نشان داد. هرچند که افزایش آسپیرین به کمپلکس h5-dna تنها در حدود 5 واحد کاهش در نسبت فوق ایجاد کرد. به طور کلی می توان نتیجه گرفت که هیستون h5 با آسپیرین استیله می شود و به دلیل خنثی شدن بخشی از بارهای مثبت آن و تغییرات بنای فضایی، میان کنش کمتری با dna برقرار می کند.